今年以来,国内环状RNA(circRNA)的研究热潮不断升温,越来越多的circRNA如春笋般涌现出来。由于circRNA的结构特殊性,如何采用定量PCR技术对circRNA平行验证成为当下一个热点问题。今天,小编邀请技术部的刘建宁老师继续为大家实例讲解circRNA的引物设计。由于内容丰富,circRNA的引物设计将分上下两篇呈现给大家。
言归正传,我们以环状RNA数据库circbase(http://circbase.org/)中收录的hsa_circ_0063162为例,为小伙伴详细介绍从circRNA序列获取到引物设计的全过程。马上动手试试吧!
CircRNA信息查找
首先访问circbase数据库(http://circbase.org/),如下图所示。
在Search上方的框中输入:hsa_circ_0063162,点击Search进行查找,查找结果如下图示。
CircRNA序列下载
3.点击position (genome browser link)
项目下的“chr22:36889679-36889850”,操作界面会跳转至UCSC数据库,界面如下图所示。
4.点击界面左方
has_circ_0063162
has_circ_0063163
按钮,会打开新的界面,如下图所示。
5.点击View DNA for this teature(hg19/Human) 按钮,进入序列下载界面,如下图所示。
6.按照默认参数,点击get DNA按钮获取序列,进入界面如下图所示。
7.将序列复制粘贴至记事本(.txt)中即获取了所需的circRNA序列信息。小伙伴你会了吗?试试获取其他的circRNA序列吧!
你好,我想请教一下,在测序分析的结果中差异表达的circRNA的fold change有正数有负数,这个正负值有什么含义么?谢谢。
大于1 高表达 小于-1 低表达
我分析环状RNA hsa_circ_0007113得到的序列长度为Genomic Size: 19018,而RegRNA2.0的最大长度为12kb,这个该如何处理,直接用剪接变体吗?